Идентификация путей сохранения полноценности яйцеклеток в системе оплодотворения in vitro как способ повышения их потенциала к эмбриональному развитию

Номер гранта:14-48-03681
Область научного знания:фундаментальные основы инженерных наук
Тип конкурса: (р_центр_а)(р_центр_а) региональный конкурс центр
Год выполнения:2014г.
Руководитель: Сингина Г.Н.
Статус заявки:поддержана

Аннотация к заявке:

Методы экстракорпорального оплодотворения созревших ооцитов животных и человека имеют широкие перспективы применения в научных исследованиях и репродуктивной медицине, а также в работах направленных на поддержание воспроизводства и сохранение генетического разнообразия животных. Однако эффективность метода остается крайне низкой, высока частота аномального эмбрионального развития, а рожденное потомство менее жизнеспособно. Основными лимитирующими факторами при получении эмбрионов являются качество ооцитов и их способность к дальнейшему развитию, приобретаемые в процессе созревания in vitro и снижающиеся в процессе последующего старения. Тем не менее научные подходы, применяемые к повышению эффективности технологии получения in vitro эмбрионов, не учитывают процессы старения яйцеклетки, происходящие после ее созревания и до момента активации, индуцированной оплодотворением. Представленный проект направлен на идентификацию путей сохранения полноценности яйцеклеток в системе оплодотворения in vitro с целью повышения их потенциала к эмбриональному развитию. В ходе выполнения проекта планируется изучить характер и механизмы действия трех потенциальных регуляторов качества созревших ооцитов - пролактина, эпидермального фактора роста и дитиотреитола, ингибирующих различные внутриклеточные пути старения яйцеклеток - на цитологические и молекулярные изменения в зрелых ооцитах, связанные с их способностью к дальнейшему эмбриональному развитию. Особое внимание будет уделено анализу процессов апоптоза и экспрессии генов, ассоциированных с качеством и криотолерантностью зародышей. Также будет оценена жизнеспособность эмбрионов после пересадки животным-реципиентам. На основании полученной информации будет разработан новый принцип модернизации системы оплодотворения ооцитов in vitro, позволяющий повысить качество полученных in vitro эмбрионов животных и человека.

Аннотация к отчету по результатам реализации проекта:

Работа была направлена на изучение характера действия пролактина, эпидермального фактора роста и дитиотреитола на качество и потенциал к эмбриональному развитию ооцитов домашней коровы. На модели пролонгированного культивирования показано, что пролактин тормозит как деструктивные трансформации метафазных хромосом, так и апоптоз в яйцеклетках, стареющих in vitro. В тоже время эпидермальный фактор роста и дитиотреитол в аналогичных условиях проявляют только антиапоптотический эффект. При проведении исследований также обнаружено, что во время оплодотворения яйцеклеток in vitro пролактин и дитиотреитол повышают их способность к дальнейшему эмбриональному развитию, что свидетельствует о способности пролактина и дитиотреитола поддерживать качество цитоплазмы зрелых ооцитов. Кроме того, впервые выявлено ингибирующее влияние пролактина в среде оплодотворения на уровень апоптоза в свежих и замороженно-оттаянных in vitro эмбрионах, что указывает на способность данного гормона повышать компетенцию зрелых ооцитов к дальнейшему развитию в процессе их оплодотворения in vitro, в то время как эпидермальный фактор роста и дитиотреитол способны только поддерживать ее уровень. Дополнительно показано что, пролактин и дитиотреитол в среде оплодотворения ооцитов положительно влияют на криоустойчивость, полученных из них бластоцист, а также то, что при оплодотворении in vitro объектом воздействия пролактина является как ооцит, так и сперматозоид, и данное воздействие имеет дозозависимый эффект. В целом в ходе выполнения проекта впервые продемонстрировано, что ингибирование процессов, ассоциированных со старением, может быть применено в качестве нового подхода к решению вопроса о сохранении полноценности яйцеклетки во время процедуры оплодотворения in vitro.
Аннотации к заявке и отчету приведены в авторской редакции. по состоянию на 28.03.2024.
Помог ли вам материал?
0    0