Мембранные белки - компоненты рецепторного комплекса (SNARE комплекса) для белка, связывающегося с фактором, чувствительным к N - этилмалеимиду: особенности их участия в селективном экзоцитозе внутриклеточных гранул нейтрофилов человека

Номер гранта:00-04-48005
Область научного знания:биология и медицинские науки
Тип конкурса: («а» (до 2016))(«а») инициативные научные проекты
Год выполнения:2000г.
Руководитель: Набокина С.М.
Статус заявки:поддержана

Аннотация к отчету по результатам реализации проекта:

Основная задача настоящего проекта состоит в исследовании участия индивидуальных белков группы SNARE в селективном экзоцитозе внутриклеточных гранул нейтрофилов человека. Были проведены эксперименты, направленные на: (1) идентификацию SDS-устойчивых SNARE комплексов в нейтрофилах человека, (2) выделение из нейтрофилов SNARE комплексов при помощи иммунопреципитации на моноспецифических антителах против различных SNARE, присоединенных к протеин А-сефарозе и (3) нейтрализацию функции SNARE белков путем введения в пермеабилизованные клетки анти-SNARE-антител. Установлено, что в нейтрофилах человека белки VAMP-1 и VAMP-2 являются компонентами SNARE комплексов, устойчивых к воздействию SDS. Продемонстрирована возможность бинарных взаимодействий in vivo синтаксина 4, белка плазматической мембраны, с мембранными белками внутриклеточных гранул: VAMP-1, VAMP-2 и SNAP-25; при этом выявлено значительное увеличение указанных белок-белковых взаимодействий при активации нейтрофилов к экзоцитозу популяции специфических и желатиназных гранул. Изучено влияние антител, направленных против VAMP-1 и SNAP-25, на экзоцитоз гранул в электропермеабилизованных нейтрофилах. Обнаружено, что белок VAMP-1 принимает участие в Ca2+- и GTP-гамма-S- индуцированном экзоцитозе как CD63-содержащих азурофильных гранул, так и CD67-содержащих специфических гранул, в то время как белок SNAP-25 является медиатором экзоцитоза популяции специфических гранул. На основании полученных результатов предполагается, что экзоцитоз специфических и желатиназных гранул может осуществляться через образование комплексов типа VAMP-1/SNAP-25/синтаксин 4 и/или VAMP-2/ SNAP-25/синтаксин 4.
Аннотации к заявке и отчету приведены в авторской редакции. по состоянию на 13.08.2022.
Помог ли вам материал?
0    0