Исследование механизмов влияния пролактина на течение холестаза беременных в животной модели

Номер гранта:11-04-00009
Область научного знания:биология и медицинские науки
Тип конкурса: («а» (до 2016))(«а») инициативные научные проекты
Год выполнения:2011г.
Руководитель: Смирнова О.В.
Статус заявки:поддержана

Аннотация к заявке:

Холестаз беременных сопровождается аномально повышенным уровнем пролактина, изменением экспрессии ряда белков-транспортеров в тканях матери и неблагоприятным прогнозом для плода. По нашим данным пролактин может усугублять течение холестаза. Проект посвящен исследованию молекулярных механизмов влияния повышенного уровня пролактина на течение холестаза беременных в крысиной модели (холестаз+псевдобеременность). Системным показателем холестаза в этой модели и контрольных группах (норма, холестаз, псевдобеременность) будет служить биодинамика билирубина, оцениваемая по его содержанию в желчи, крови и моче. Негативное влияние холестаза беременных определяется цитотоксическим действием продуктов обмена, накапливающихся в крови в результате нарушения координированной работы печени и почек. Клетки этих органов крысы будут являться основными объектами исследования. В дифференциально выделенных гепатоцитах и холангиоцитах печени, а также в коре и мозговом слое почки исследуемых групп животных будет сопоставлена экспрессия мРНК потенциальных мишеней действия пролактина с экспрессией мРНК изоформ рецептора пролактина и с уровнем пролактина. Параллельно предусмотрена иммуногистохимическая оценка клеточных особенностей и уровня манифестации исследуемых белков. В качестве вероятных молекулярных мишеней действия пролактина планируется выбрать транспортеры билирубина: белки 2 и 3 множественной устойчивости к лекарствам (MRPs 2 и 3); хлорный канал - трансмембранный регулятор кистозного фиброза (CFTR), аквапорины и/или некоторые другие транспортеры продуктов обмена, воды и солей. В результате работы предполагается выявить ключевые молекулярные мишени действия пролактина в клетках печени и почки, определяющие его итоговое влияние на биодинамику билирубина, и проверить гипотезу о прохолестазном действии пролактина, ухудшающим течение холестаза беременных.

Аннотация к отчету по результатам реализации проекта:

В крысиной модели холестаза беременных показано, что разные участки нефрона отличаются по наличию, типу и направленности регуляции манифестации рецептора пролактина своим лигандом. Уровень рецепторного белка в холангиоцитах в модели холестаза беременных повышен по сравнению с нормальными самками и понижен по сравнению с самками с холестазом. Холестазом индуцируются противоположные изменения интенсивности манифестации рецепторного белка в клетках почки и печени. В модели холестаза беременных в гепатоцитах выявлено относительно равномерное усиление экспрессии мРНК короткой и длинной изоформ рецептора пролактина по сравнению с холестазом, не осложненным гиперпролактинемией, при поддержании соотношения изоформ. В модели холестаза беременных, и в контрольных группах определен уровень мРНК mrp2, mrp3 и CFTR в дифференциально выделенных гепатоцитах и холангиоцитах. Показано, что уровень мРНК короткой и длинной изоформ рецептора пролактина, а также мРНК mrp2 в коре почки нормальных самок крыс выше, чем в мозговом слое. Отработан метод ПЦР в реальном времени для анализа экспрессии мРНК аквапоринов 1,2,3 и 4 в гепатоцитах, холангиоцитах и тканях коры и мозгового слоя почки. Отработаны методы иммуногистохимического анализа манифестации mrp2, mrp3 и CFTR в ткани почки. В модели холестаза беременных обнаружен рост диуреза и суточного потребления воды по сравнению с контрольными группами, что сопровождается снижением концентрации билирубина в моче, ее ростом в желчи и сохранением в крови при неизменности суточной экскреции билирубина с мочой и его клиренса почкой. При холестазе выявлено увеличение мочевого пространства капсулы Боумена. Это увеличение не обнаружено при сочетании холестаза с гиперпролактинемией в модели холестаза беременных, что согласуется с ростом диуреза в этой модели по сравнению другими группами. Гиперпролактинемия как в модели холестаза беременных, так и в отсутствие холестаза в почке индуцировала рост количества клеток в клубочках и их диаметр, а в печени количество желчных протоков, особенно в модели холестаза беременных.
Аннотации к заявке и отчету приведены в авторской редакции. по состоянию на 06.05.2021.
Помог ли вам материал?
0    0